熒光PCR凍干之Tris

Tris又叫三羥甲基氨基甲烷。是一種白色結(jié)晶或粉末， 溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、 苯， 是一種有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。其本身有很高的緩沖能力， 在水中溶解度高，對(duì)很多酶呈惰性反應(yīng)， 它的這一特性使得 Tris 成為用于許多生化目的非常滿(mǎn)意的緩沖液。用于穩(wěn)定反應(yīng)體系的 pH，在 pH7.5-9.0 之間有較強(qiáng)的緩沖能力。其緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線(xiàn)蟲(chóng)核纖層蛋白的中間纖維的形成。其本身也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一。此外還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。熒光PCR凍干體系優(yōu)化方法：沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)采用單一因素法，有一定經(jīng)驗(yàn)的采用多因素法。單一因素法篩選出保護(hù)效果比較好的保護(hù)劑，再將保護(hù)效果好的保護(hù)劑進(jìn)行組合，產(chǎn)生終配方。

Pilot7-12T應(yīng)用示例（熒光PCR凍干）：

1. 探針、底物、引物原料要求確定。
2. 凍干溶液配方開(kāi)發(fā)，采用正交法或響應(yīng)曲面法進(jìn)行輔料篩選。
3. 選擇適合的包材和模具。
4. 設(shè)計(jì)凍干曲線(xiàn)配合輔料篩選。
5. 確定配方及工藝。
6. 穩(wěn)定性測(cè)試。
7. 根據(jù)穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果修正工藝或配方。
8. 整個(gè)環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設(shè)備、人員的結(jié)合。